Lateral flow assays Abcam
Анализы в латеральном потоке, также известные как иммунохроматографические анализы или стрип-тесты, представляют собой иммуноанализы, которые используются для обнаружения присутствия или отсутствия целевого аналита в образце. Поскольку они подходят для тестирования на месте и оказания медицинской помощи, очень быстро дают результат и предлагают простое и удобное управление, их популярность быстро растет.
Анализы в латеральном потоке традиционно основывались на использовании антител, конъюгированных с окрашенными детектирующими фрагментами, такими как наночастицы золота или латексные шарики. Колориметрические показания позволяют быстро визуально оценить результат анализа, однако, несмотря на широкое и хорошо документированное использование колориметрических методов обнаружения, многие исследователи вместо этого обращаются к флуоресцентным меткам, таким как флуоресцентные красители, флуоресцентные белки или частицы европия, поскольку они имеют ряд преимуществ:
Повышенная чувствительность анализа
Количественное считывание
Возможность мультиплексирования
Компания Expedeon создала широкий спектр продуктов, которые помогут вам упростить разработку анализа в латеральном потоке, включая наборы для производства реагентов с флуоресцентной меткой.
Lightning-Link для производства флуоресцентно-обозначенных антител:
Технология Lightning-Link позволяет напрямую маркировать антитела, белки, пептиды или любые другие биомолекулы свободными аминогруппами. Ассортимент продукции включает наборы для помечания биомолекул широким спектром флуорофоров, охватывающих спектр от УФ до дальнего инфракрасного диапазона, и поэтому идеально подходит для использования в анализах в латеральном потоке, которые требуют иммунофлуоресцентного считывания.
Комплекты Lightning-Link чрезвычайно быстры и просты в использовании. Реакцию конъюгации инициируют простым добавлением биомолекулы во флакон с лиофилизированной смесью, содержащей интересующую метку, и инкубированием. Без этапов разделения извлекается 100% материала; и поскольку образующаяся связь является ковалентной, полученные конъюгаты очень стабильны.
Хотя многие флуоресцентно-меченные конъюгаты антител можно визуализировать на глаз (при условии, что конъюгат антител присутствует в подходящей концентрации), для флуорометрического обнаружения чаще используют специализированный считыватель полосок. Он должен быть оснащен соответствующими фильтрами для обнаружения флуорофора. Если проводится мультиплексный анализ латерального потока, следует тщательно учитывать свойства каждого флуорофора.
Чтобы просмотреть свойства каждого из флуорофоров, включая максимальную длину волны поглощения и максимальную эмиссию, а также значения коэффициента экстинкции, откройте справочную карту флуоресценции, нажав здесь.
Схема, на которой изображены антитела, добавляемые в раствор Lightning-Link для маркировки вашего антитела:
Сопряженный Check&Go! для подтверждения успешной конъюгации антител:
Сопряженный Check&Go! kit представляет собой тест-полоску для анализа в латеральном потоке для подтверждения успешной конъюгации антитела IgG с цветной меткой. Он совместим с конъюгатами антител, полученными с использованием многих наборов для обозначения флуоресцентных антител Lightning-Link, а также с конъюгатами, полученными с использованием коллоидного золота, InnovaCoat GOLD и наборов для конъюгации латекса. Набор совместим с антителами IgG различных видов при условии, что они обладают сродством к белку A или G, которые иммобилизованы на тест-линии.
Сопряженный Check&Go! использовали для подтверждения успешной конъюгации IgG с флуоресцентным белком (RPE), тандемным красителем (APC/Cy5.5) или метками флуоресцентного красителя (флуоресцеин, Cy5.5). Интенсивность линий варьируется в зависимости от выбора метки: флуоресцентные красители требуют более высокой концентрации конъюгата антител для образования видимой линии по сравнению с флуоресцентными белками и тандемными красителями. Интенсивность линии также зависит от цвета этикетки.
Euporium conjugation kits - Наборы для конъюгации Эупория:
Для анализов в латеральном потоке, требующих еще более высокой степени чувствительности, компания Abcam предлагает набор для конъюгации Euporium. Они позволяют напрямую маркировать антитела, белки, пептиды или любые другие биомолекулы свободными аминогруппами на 200-нм хелатных микросферах Euporium (Eu). Частицы Euporium имеют специально обработанную поверхность, что позволяет генерировать высокостабильные ковалентные конъюгаты, устойчивые к агрегации и не требующие значительной оптимизации pH.
Компания Abcam протестировала конъюгаты антител, полученные с использованием набора для конъюгации Europium, как в формате тест-полосок, так и в тест-полосках в формате бокового проточного анализа, и оценив показания получила качественный результат с помощью УФ-трансиллюминатора и количественный результат с помощью считывающего устройства с боковым потоком.
Схема, изображающая процесс конъюгации Euporium:
Dipstick lateral flow assay - анализ бокового потока с помощью щупа:
Во время анализа с помощью тест-полоски конъюгированное антитело добавляется непосредственно в раствор, содержащий целевой аналит, с которым оно связывается. Затем тест-полоску с боковым потоком погружают в раствор, и аналит и реагент для обнаружения протекают вдоль нитроцеллюлозной мембраны к впитывающей подушечке. Аналит связывается с тестовой линией, которая обычно состоит из второго специфического антитела, иммобилизованного на мембране. Контрольная линия, обычно состоящая из антивидового антитела (против вида-хозяина конъюгата антитела) располагается дальше вдоль полоски.
На схеме представлен анализа: антитело против СРБ конъюгировали с частицами Euporium с помощью набора для конъюгации Euporium Innova, и конъюгат добавляли к раствору, содержащему известную концентрацию СРБ. В раствор погружали тест-полоску для измерения бокового потока, состоящую из нитроцеллюлозной мембраны и впитывающей подушечки. Положительный результат на тестовой линии указывает на наличие СРБ. На изображении полосок латерального потока показаны данные, полученные с УФ-трансиллюминатора, демонстрирующие низкий фон, отсутствие признаков агрегации и чувствительность 0,25–0,5 нг/мл. На графике показаны те же данные, полученные с помощью стрипа-ридера с боковым потоком, с чувствительностью 0,063 нг/мл. Обратите внимание, что в этом случае контрольная линия не была включена.
Strip test lateral flow assay - стрип-тест с боковым потоком:
Основное различие между анализом с использованием тест-полосок и анализом с полосками заключается в том, что тест с полосками включает в себя площадку для высвобождения конъюгата, которая представляет собой часть анализа в латеральном потоке, в которой конъюгированное антитело было высушено. Образец добавляется в подушечку для нанесения образца, из которой он перетекает в подушечку для высвобождения конъюгата. Затем аналит и реагент для обнаружения движутся вдоль нитроцеллюлозной мембраны к впитывающей подушечке. Анализируемое вещество связывается на тестовой линии, и, как и в тесте-полоске, контрольная линия обычно располагается дальше вдоль полоски.
Тест-полоска в латеральном потоке для оценки конъюгата антитело-частицы Euporium. На схеме представлен формат анализа: антитело против СРБ было конъюгировано с частицами Euporium с использованием набора для конъюгации Euporium Expedeon и высушено на подушечке для высвобождения конъюгата. Затем на подушечку для нанесения образца добавляли раствор, содержащий известную концентрацию СРБ, добавленный в 100%-ную сыворотку, СРБ. Положительный результат на тестовой линии указывает на наличие СРБ в сыворотке. На графике показаны данные, полученные с помощью считывателя полосок с боковым потоком, демонстрирующие низкий фон и высокую чувствительность. Обратите внимание, что в этом случае контрольная линия не была включена.
Мы предлагаем широкий ассортимент продукции Abcam, подходящей для флуоресцентной детекции в латеральном потоке, включая наборы для антител с флуоресцентными красителями, флуоресцентными белками или частицами Euporium, а также наш конъюгат Check&Go! kit для подтверждения успешной конъюгации антител. Если у вас есть какие-либо вопросы, пожалуйста, свяжитесь с нами.
Наша компания осуществляет закупку и доставку товаров указанного производителя на Ваш адрес. Транспортировка происходить строго согласно инструкциям и рекомендациям поставщика.
Все подробности можно узнать у нашего менеджера любым удобным способом.
Узнать цены и подробности
